準(zhǔn)確地測(cè)定聚丙烯酰胺的有效含量或濃度在其結(jié)構(gòu)分析與應(yīng)用中都是十分重要的。在應(yīng)用條件下，聚丙烯酰胺的含量常低至(0.1~20)×10-6g/L,準(zhǔn)確測(cè)定如此低的PAM濃度具有很大的困難。*為此開(kāi)發(fā)了多種測(cè)試方法，以適應(yīng)在不同的場(chǎng)合與干擾物存在下PAM濃度的測(cè)定。這些方法中，GPC法、濁度法、N-溴代酰胺法及熒光分光光度法具有較好的選擇性、抗干擾性和較高的靈敏度和普適性，而被廣為采用。需指出的是因各種方法依據(jù)不同的化學(xué)結(jié)構(gòu)，只有在結(jié)構(gòu)組成相同時(shí)才能給出真實(shí)的濃度。下面對(duì)這幾種測(cè)定方法做一簡(jiǎn)要介紹。

1.凝膠滲透色譜法

      GPC法是集分離與濃度檢測(cè)于一體的分析方法。前面已介紹了GPC用于聚丙烯酰胺分子量及分布的測(cè)定。借助分離功能，GPC法還可以很好地適用于混有低分子物質(zhì)的PAM濃度的檢測(cè)。此時(shí)選用的色譜柱填料的孔尺寸較小，使PAM處于分離上限，在空隙體積V處以一窄峰出現(xiàn)，以提*分中PAM的濃度和檢測(cè)精度。濃度檢測(cè)器可以是示差折光計(jì)(RI)或紫外分光(UV)檢測(cè)器。

      采用UV檢測(cè)器可獲得更高的靈敏度，其檢測(cè)下限濃度可達(dá)1mg/L。GPC法的關(guān)鍵是選擇合適的色譜條件，如填料種類(lèi)、孔尺寸和流動(dòng)相組成等。應(yīng)指出的是，無(wú)論是RI法還是UV法，其濃度響應(yīng)都依賴(lài)于樣品中PAM的結(jié)構(gòu)（如水解度等）。因此濃度的真實(shí)數(shù)據(jù)需要組成的校正。

2.濁度法

      聚丙烯酰胺與某些化學(xué)試劑反應(yīng)可生成不溶性的絡(luò)合物，在較低濃度下這種不溶物以膠體形式穩(wěn)定懸浮在溶液中，散射光造成溶液的濁度。在一定條件下溶液的濁度與聚合物的濃度成正比關(guān)系，可以用分光光度計(jì)或濁度計(jì)來(lái)測(cè)量。

      常用的化學(xué)試劑有季銨鹽、新潔爾滅、陽(yáng)離子聚胺、次氯酸鈉以及鞣酸等。

      采用陽(yáng)離子化合物可以測(cè)定陰離子型聚丙烯酰胺的濃度，測(cè)定的靈敏度隨PAM的水解度增加而提高。對(duì)不同水解度的聚丙烯酰胺樣品，采用先在高溫高pH值下水解至相近的水解度后再進(jìn)行測(cè)定，使其

表現(xiàn)出相近的靈敏度[80。硫酸鹽、硝酸鹽、溴酸鹽、溴化鹽及磷酸鹽在濃度大于10000mg/L以上時(shí)才會(huì)對(duì)測(cè)試產(chǎn)生干擾，但硫酸月桂酯在300mg/L時(shí)就會(huì)產(chǎn)生影響。加入3%檸檬酸鈉可以消除陰離子表面活性劑的干擾，標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的線(xiàn)性區(qū)域可達(dá)20mg/L。

      采用次氯酸鈉為反應(yīng)試劑可以測(cè)得含丙烯酰胺結(jié)構(gòu)單元的共聚物濃度。增加丁醇萃取過(guò)程可消除濃度低于0.5%的磺酸鹽表面活性劑的干擾，但這一萃取過(guò)程使實(shí)驗(yàn)誤差由1%增大至5%81。采用次氯酸鈉溶液作沉淀劑，在乙酸存在下于470nm處測(cè)定吸光度。發(fā)現(xiàn)單價(jià)與二價(jià)的陽(yáng)離子和某些酸根離子對(duì)測(cè)定結(jié)果沒(méi)有影響，但三價(jià)陽(yáng)離子有明顯的干擾，需在標(biāo)準(zhǔn)溶液中加入等量的三價(jià)離子消除，同時(shí)HPAM與次氯酸鈉、乙酸的比例不同時(shí)得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)也不同。

      鞣酸則適用于非離子或陽(yáng)離子聚丙烯酰胺的測(cè)定，檢測(cè)濃度的范圍為0.1~10mg/L,檢測(cè)下限可達(dá)0.1mg/L,但其校正曲線(xiàn)的線(xiàn)性區(qū)域只到2mg/L。Hanasaki 發(fā)現(xiàn)在10~30℃之間測(cè)定時(shí)吸光度不依賴(lài)于溫度，但pH值的影響顯著，在高pH值下鞣酸會(huì)發(fā)生氧化，干擾測(cè)定，因此測(cè)定時(shí)pH值應(yīng)低于7。

      在濁度法中，低濃度下沉淀物的形成需要一定的時(shí)間，濁度也需要一定的時(shí)間才能達(dá)到穩(wěn)定值。因此制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)需保證在相同的操作條件下進(jìn)行。為保證測(cè)試條件的同一性，并提高測(cè)樣速率，可采用流動(dòng)注射分析法。